目前，藥用抗體的研發(fā)主要基于雜交瘤細胞或者體外抗體庫。通過抗原設計和抗體篩選，人們初步獲得陽性的hits，再進一步通過一系列生物性質檢測和功能驗證，最終得到有藥用潛力的抗體。在實際研發(fā)過程中，經(jīng)過了常規(guī)篩選所得的抗體，有諸多方面需要更細致的改進，包括親和力、免疫原性、半衰期等等，抗體領域這些年來做了很多相關的研究和實踐。其中，抗體親和力成熟是研究的重要方向之一。理論上，抗體親和力的提高有助于改善抗體的特異性和效力，有助于減少用藥劑量，降低毒副作用等。雖然實際的研究工作證明親和力的提高與抗體效價的提高并不總是線性的關系，尤其在實體瘤的治療上（可參考Weinstein的“binding site barrier”假說[1]），但很多情況下，這個線性關系是明顯存在的。另外，發(fā)展抗體親和力成熟的技術，不僅有助于抗體藥物的研發(fā)和質量改善，同時也有助于人們更好地理解抗體與靶點相互作用的機理，更好地認識靶點的功能。

本文中，小編就與大家分享自己對抗體親和力成熟技術的簡單總結。本文涉及的技術內容整理如下，之后的行文將圍繞這個提綱展開：

1. 模擬體細胞高頻突變的抗體親和力成熟策略

BCR基因重排后的成熟B細胞受到抗原刺激后，會于生發(fā)中心發(fā)生重鏈和輕鏈V區(qū)的高頻率突變（主要是點突變），之后再經(jīng)過FDC捕獲抗原使表達高親和力BCR的B細胞免于凋亡。這一過程使得后代B細胞的BCR對抗原的平均親和力得到提升。這樣的體細胞高頻突變屬于二次免疫應答，幫助可有效識別抗原的抗體進一步成熟，有助于機體有效抵抗外來抗原的再次入侵。

抗體親和力成熟的策略之一，就是模擬體細胞高頻突變，通過細胞突變和展示抗體蛋白篩選對抗原高親和的抗體。

1.1 基于B細胞系（人、雞等）高頻突變的篩選策略

Ramos是來源于人Burkitt淋巴瘤的一株細胞系，在培養(yǎng)過程中其重排后的免疫球蛋白V區(qū)基因持續(xù)發(fā)生組成型突變，并表達到膜表面。早在2002年Sarah等人就報道了利用Ramos細胞系篩選出對鏈霉親和素有高親和力的IgM[2]。他們將鏈霉親和素結合到磁珠上，從一群Ramos細胞中篩出對鏈霉親和素有低親和力的細胞群，之后降低磁珠上的鏈霉親和素的密度以提高篩選的苛刻程度，進一步篩出親和力更高的突變。之后又進一步用標記FITC熒光的鏈霉親和素結合流式分選將抗體親和力進一步提高。

隨后，他們對各批次的亞克隆細胞的V區(qū)基因做了�